自21世紀，生物技術進入高速發(fā)展期，開發(fā)出結構更加復雜、表達量更高的生物大分子樣品。隨之而來對生物藥物的制備技術及工藝提出挑戰(zhàn)，層析技術具有優(yōu)異的分離效果、溫和的色譜條件對生物大分子十分友好，可以保證生物樣品活性，是目前下游純化的首選方法。離子交換層析技術可用于抗體、VLP、蛋白、mRNA、質粒、多肽等生物大分子的純化，在樣品粗純、中純以及精制中應用廣泛，在四大層析技術中占據(jù)重要地位。

　　賽分科技專注于色譜層析技術，為應對復雜生物大分子樣品的純化，保證填料較高載量的同時，進一步提升填料的耐堿性能，延長填料使用壽命，我們推薦兩款具有高耐堿、高回收率的陰離子交換填料，分別為強陰離子交換填料Monomix Mab60-Q以及弱陰離子交換填料Monomix HC60-DEAE Excel。

*強陰離子交換基團為季銨，弱陰離子交換基團二乙氨基

產品介紹

　　Monomix AEX陰離子交換層析介質均以親水性聚甲基丙烯酸酯為基質，粒徑為60 μm，孔徑1000 Å，具有良好的物理化學穩(wěn)定性。Monomix AEX為觸手型陰離子交換層析填料，觸手是長線形的聚合物鏈，攜帶功能配位體，聚合物鏈與基質以共價鍵連接，該構型提供了高比表面積，使生物分子不受空間位阻，與可及的配位體結合?？蓮V泛適用于抗體、疫苗、胰島素、蛋白、核酸、肝素等生物樣品的分離和純化。

填料性能參數(shù)

　　產品特點

　　更高的耐堿性——延長使用壽命，降低生產成本

　　更低工作壓力——易于放大，適應大規(guī)模制備

　　高蛋白回收率——高回收率，減少損失

　　更優(yōu)pH平衡能力——更高效的操作

　　高耐堿性-Monomix Mab60-Q

　　考察Monomix Mab60-Q填料在1 M NaOH中浸泡，樣品的保留時間及DBC的變化情況，結果表明1 M NaOH泡堿240 h后，標準蛋白保留時間（表1）未出現(xiàn)明顯變化，DBC維持在90%以上(表2)。

表1 Monomix Mab60-Q填料泡堿前、后保留時間變化

表2 Monomix Mab60-Q填料泡堿前、后DBC的變化

　　高流速-Monomix Mab60-Q

　　Monomix Mab60-Q離子交換填料在常規(guī)線速度下（100~200 cm/h）壓力為0.5 bar左右，在1000 cm/h 線速度下壓力在2.4 bar左右，操作壓力低，有利于放大生產。

圖1 Monomix Mab60-Q壓力-流速曲線

　　非特異性吸附低-Monomix Mab60-Q

　　采用標準牛血清蛋白（BSA）檢測填料的非特異性吸附（NSB，圖2），BSA標準樣品連續(xù)上樣16次，進樣量不變，對樣品峰面積進行積分，計算第一針樣品與最后一針樣品峰面積百分比，結果顯示BSA重復上樣后比值為97.2%，表現(xiàn)出較低的非特異性吸附。

圖2 Monomix Mab60-Q非特異性吸附(NSB)測試峰面積趨勢圖(BSA)

　　案例展示-Monomix Mab60-Q

　　實驗考察賽分科技軟膠陰離子交換填料Agarosix Q FF填料與硬膠Monomix Mab60-Q對雙抗樣品中HCP的去除效果（表3），結果顯示Monomix Mab60-Q在雙抗樣品HCP去除實驗中蛋白回收率大于97%；HCP去除率及蛋白收率與Agarosix-Q FF相近。

表3 Monomix Mab60-Q與Agarosix Q FF某雙抗樣品中HCP去除及收率對比

　　*注：HCP殘留檢測中標曲從0-100 ng/mL，原樣檢測到HCP濃度超過線性范圍最大值100 ng/mL。

　　高耐堿性-Monomix HC60-DEAE Excel

　　考察Monomix HC60-DEAE Excel填料在1 M NaOH中浸泡，樣品在填料中保留時間及DBC的變化情況。結果表明1M NaOH泡堿240 h后，標準蛋白保留時間未出現(xiàn)明顯變化，DBC維持在85%以上。

表4 Monomix HC60-DEAE Excel填料泡堿前、后保留時間變化

表5 Monomix HC60-DEAE Excel填料泡堿前、后DBC的變化

　　高流速-Monomix HC60-DEAE Excel

　　Monomix HC60-DEAE Excel填料在常規(guī)線速度下（100~200 cm/h）壓力為0.5 bar左右，在1000 cm/h 線速度下壓力在2.0 bar左右，操作壓力低。

圖3 Monomix HC60-DEAE Excel壓力-流速曲線

　　低非特異性吸附-Monomix HC60-DEAE Excel

　　采用標準牛血清蛋白（BSA）檢測填料的非特異性吸附（NSB，圖4），BSA重復進樣16次，計算第一針與最后一針的峰面積比值為98.6%，結果顯示該填料對標準蛋白BSA的非特異性吸附低。

圖4 Monomix HC60-DEAE Excel NSB測試峰面積趨勢圖（ BSA ）

　　良好的pH值穩(wěn)定性- Monomix HC60-DEAE Excel

　　實驗條件：

　　Column: 0.3421*16.5=5.645 mL

　　Mobile Phase: A1：0.5M NaOH  

　　A2：10mM Tris+3%蔗糖+1M NaCl   

　　A3：50mM Tris+3%蔗糖

　　Flow rate：1.129 mL/min     

——Cond；—— pH值

圖5 Monomix HC60-DEAE Excel填料pH穩(wěn)定性測試圖譜

　　Monomix HC60-DEAE Excel在高鹽切低鹽后3-4 CV能達到pH平衡且穩(wěn)定，可以實現(xiàn)快速、高效操作。

　　歡迎試用、訂購Monomix Mab60-Q & Monomix HC60-DEAE Excel

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